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抗体理化分析工具酶——助力生物药物的开发和质量控制
背景用作生物药物的治疗性抗体结构复杂，异质性高，在制造过程中需要严格监管和控制。抗体分子大小异质性是抗体的生产工艺优化、生产过程控制及放行分析中重要质控指标之一。为了确保单克隆抗体及其他生物分子药物的安全性和有效性，需要对这些药物进行全面深入的表征分析。随着获批的抗体药物逐年急剧增加，例如 mAb、Fc 融合蛋白、Fab、ADC、双特异性抗体和双特异性 T 细胞接合剂 (BiTE)，了解单个翻译后修饰 (PTM)可以更好地分析和预测治疗性抗体的体内功效、药代动力学和作用机制。治疗性抗体的表征通常从几个角度进行，从自上而下的分析（整体结构）到自下而上的分析（肽测序），最后是中层分析（Fc、Fv、PTM）。ACROBiosystems百普赛斯可提供一系抗体理化分析工具酶，用于协助单克隆抗体、融合蛋白药物、生物类似药等生物药的表征分析及其相关翻译后修饰，助力生物药物的开发和质量控制。产品列表产品详情 货号 单位定义 Endo H (500U/μl) ENH-S5116 One unit is defined as the amount of enzyme required to remove >95% of the carbohydrate from 10?g of denatured RNase B in 1 hour at 37°C in a total reaction volume of 10?l. Endo S (200U/μl) ENS-S5143 One unit deglycosylates ≥ 95% of 1 μg human IgG, when incubated in 10 mM sodium phosphate, 150 mM NaCl, pH7.4 at 37°C for 30 min. SpeB (40U/μl) SPB-S5115 One unit digests ≥ 95% of 1 ?g human IgG1 when incubated in PBS ith 5 mM DTT or TCEP, pH 7.4 at 37°C for 1 hour. IdeS (20U/μl) IDS-S5143 One unit digests ≥ 95% of 1 μg human IgG when incubated in 10 mM sodium phosphate, 137 mM NaCl, 2.7 mM KCl, pH7.4 at 7°C for 30min. 3C (HRV) 3CC-N3133 One unit will cleave >95% of 100 ?g control fusion protein in 50 mM Tris-HCl, 150 mM NaCl, pH 7.5 at 4℃ for 16 hour. 聚糖分析工具酶N-连接聚糖的结构会影响单克隆抗体 (mAb) 和 Fc 融合蛋白等治疗性蛋白质的免疫原性、药代动力学和药效学。因此，N-聚糖表征对于生物治疗药物开发过程至关重要。Endo H和Endo S等酶可对N-糖蛋白进行特异性裂解，用于后续分析。Endo H (500U/μl) (Cat .No. ENH-S5116)
产品用途：
Endo H是一内切糖苷酶，能够专一切割β-1,4-糖苷键连接的高甘露糖型结构和某些杂合型糖蛋白，形成带有一个N-乙酰葡萄糖胺的糖蛋白结构，用于表征聚糖位置和结构。切割后的蛋白仍具有生物活性，不影响其功能等的后续研究。
产品特点:
切割甘露糖型结构和某些杂合型糖蛋白，不切割复杂的糖型
SDS-PAGE测定纯度≥95%
最佳反应PH：5-6
反应时间：60minEndo S (200U/μl) (Cat .No. ENS-S5143)
产品用途：
Endo S 是一种IgG高特异性内切糖苷酶，可快速水解 IgG 重链N-聚糖的壳二糖核心（在 IgG 的 Fc 域上）中间的β-1,4糖苷键，快速降低样品复杂性。底物包括人IgG1-4、来自小鼠、大鼠、猴、绵羊、山羊、牛和马的IgG。
产品特点:
去除复杂聚糖，对高甘露糖和杂合型聚糖的活性有限
SDS-PAGE测定纯度≥95%
反应时间：30min抗体亚基片段化蛋白酶SpeB (40U/μl) (Cat. No. SPB-S5115)
产品用途：
SpeB是一种重组表达的半胱氨酸蛋白酶，它可以在还原条件下在铰链上方的特定位点消化下可在消化多种物种来源（包括人、小鼠、大鼠和山羊等）和亚型的抗体铰链区并生成 Fab 和 Fc 片段。经纯化、同质的Fab片可用于许多应用，包括：研究 Fab 片段与抗原的单价结合。
消除Fc介导的效应子功能。
减少来自 Fc 相互作用的非特异性结合。
产品特点:
抗体类型: 人lgG1-4、小鼠、大鼠、山羊、绵羊、兔lgG
酶切位点（人lgG1）: KTHT/CPPCPAP (铰链上方)
高酶活： 40u/μl
反应时间：60 min
反应条件: 需要还原条件IdeS (20U/μl) (Cat. No. IDS-S5143)
产品用途：
IdeS 蛋白酶特异性地将铰链区下方的 IgG 切割成 F(ab?)2 和 Fc 片段。然后使用质谱或 HPLC 等技分析这些片段。
产品特点:
底物类型：人 IgG1~4、猴、绵羊、兔 IgG、Fc融合蛋白、小鼠 IgG2a、IgG3；
酶切位点（人 IgG1）：CPAPELLG / GPSVF（铰链下方）
高酶活：20U/μl
反应时间：60 min标签切除工具酶HRV-3C Protease Cleavage Enzyme Protein, GST Tag (active enzyme) (Cat .No. 3CC-N3133)
产品用途：
人鼻病毒 3C 蛋白酶（HRV 3C 蛋白酶）识别Leu-Glu-Val-Leu-Phe-Gln↓-Gly-Pro 切割位点的半胱氨酸蛋白酶，识别序列具有非常高的特异性，可去除含 HRV 3C 蛋白酶切割位点序列的蛋白中的融合标。产品特点:
去除目标蛋白中的纯化标签
高酶活
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京公网安备 11030102010599号 京ICP备16032159号-1